Противовирусный CRISPR
CRISPR/Cas13 запрограммировали на уничтожение человеческих вирусов
Исследователи использовали систему CRISPR/Cas13 в качестве противовирусного и диагностического средства для РНК-вирусов. Статья об этом была опубликована в журнале Molecular Cell (Freije et al., Programmable Inhibition and Detection of RNA Viruses Using Cas13).
Многие из наиболее распространенных и смертоносных патогенов человека в мире являются вирусами на основе РНК – например, Эбола, Зика и грипп, и большинство из них не имеют одобренных регуляторами методов лечения.
«Вирусные патогены человека чрезвычайно разнообразны и постоянно адаптируются к окружающей среде, даже в пределах одного вида, что подчеркивает как проблему, так и потребность в гибких антивирусных платформах, – отмечает один из исследователей, сотрудник Медицинского института Говарда Хьюза Пардис Сабети. – Мы создали платформу CARVER (Cas13-Assisted Restriction of Viral Expression and Readout), которая показала себя мощной и быстро программируемой диагностической и антивирусной технологию для лечения широкого спектра вирусных заболеваний».
Для того чтобы исследовать новые противовирусные стратегии, команда сфокусировалась на Cas13, который фокусируется на вирусной РНК в бактериях в естественной среде. Этот белок можно запрограммировать, чтобы удалять специфические последовательности рибонуклеиновой кислоты из вирусных частиц. Несмотря на небольшие ограничения, метод относительно легок для применения на практике и исследования в лаборатории.
Команда ученых сначала проверила набор РНК-вирусов в поисках последовательностей, которые Cas13 может эффективно удалить. В первую очередь исследователи искали отрезки, которые с наименьшей вероятностью мутируют и, скорее всего, отключат вирус при разрезании.
Исследователи экспериментально проверили активность Cas13 в клетках человека, инфицированных одним из трех различных вирусов на основе РНК: лимфоцитарным вирусом хориоменингита (LCMV), вирусом гриппа A (IAV) и вирусом везикулярного стоматита (VSV). Они ввели в клетки ген Cas13 и направляющую РНК, а через 24 часа подвергли образцы воздействию вируса. Еще через 24 часа ферменты Cas13 снизили уровень вирусной РНК в клеточных культурах до 40 раз.
Затем ученые исследовали влияние Cas13 на вирусную инфекционность – другими словами, сколько оставшегося вируса может фактически продолжать заражать человеческие клетки. Данные показали, что через восемь часов после воздействия вируса Cas13 снизил инфекционную способность гриппа более чем в 300 раз.
Портал «Вечная молодость» http://vechnayamolodost.ru