Генотерапия против ВИЧ
Японские ученые применили метод геномного редактирования для инактивации вируса иммунодефицита человека
Марина Аствацатурян, «Эхо Москвы»
Разрушив регуляторные гены вируса, вызывающего СПИД, посредством системы геномного редактирования CRISPR/Cas9, группа исследователей из Университета Кобе (Kobe University) заблокировала воспроизведение частиц ВИЧ инфицированными клетками. Об этом сообщает статья в Scientific Reports (Ophinni et al., CRISPR/Cas9 system targeting regulatory genes of HIV-1 inhibits viral replication in infected T-cell cultures).
Поражение вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ-1) – это хроническое заболевание, которое в мире диагностировано у 35 с лишним миллионов человек. Уровень инфекции можно контролировать антиретровирусными препаратами, но полного излечения не бывает.
Одна из основных проблем заключается в невозможности удалить клетки с латентной, еще не проявившейся ВИЧ-инфекцией: по мере размножения вируса его гены внедряются в хромосомы зараженных клеток и воспроизводятся вместе с генетическим материалом клетки, до поры ничем себя не выдавая.
Применяющаяся с недавних пор система геномного редактирования CRISPR/Cas9 представляется японским ученым перспективным инструментом для инактивации генов ВИЧ, встраивающихся в хромосомы пораженных этим вирусом людей: она разрезает гены в определенных местах, что позволяет удалять или добавлять участки ДНК.
Исследователи из Кобе нацелились на два гена, которые регулируют размножение ВИЧ, эти гены называются tat и rev. Исходя из генетической информации о шести основных подтипах вируса иммунодефицита человека, они сконструировали шесть типов направляющей РНК, которая обеспечивает специфичность редактирования системой CRISPR/Cas9.
Дальше ученые создали вектор – специальную конструкцию на основе особого вируса с длинным инкубационным периодом, лентивируса, несущего гены разрезающего фермента Cas9 и направляющую РНК. При внесении такого вектора с редактирующей системой в культуру клеток, которые производили продукты генов tat и rev, авторы добились существенного снижения активности генов-мишеней, и, соответственно, уровня их продуктов.
Никаких побочных, нежелательных мутаций при этом не наблюдалось, равно как и изменения в выживаемости культивируемых клеток. Вводя редактирующую систему в культуру клеток с латентной или постоянной ВИЧ-инфекцией, авторы заметно подавили реактивацию ВИЧ, зависимую от белков иммунной системы цитокинов, а также воспроизведение вирусного материала в хронически инфицированных клетках. Более того, одновременное внесение всех шести типов РНК-проводника почти полностью заблокировало продукцию вируса инфицированными клетками.
Портал «Вечная молодость» http://vechnayamolodost.ru